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    易科泰呼吸碳-13 穩(wěn)定同位素技術(shù)在動物生理生態(tài)研究中的應(yīng)用

    發(fā)布時間: 2025-11-14  點擊次數(shù): 311次

    能量代謝測量系統(tǒng)通過得到VO2、VCO2、RER指標(biāo)來推斷動物的能量消耗,以及總的代謝底物利用(如碳水化合物、脂肪、蛋白質(zhì)),是連續(xù)測量動物能量消耗的技術(shù),但不能區(qū)分、量化外源性(如食物攝?。┖蛢?nèi)源性(動物自身的組織成分)底物,以及某些營養(yǎng)素的氧化消耗。

    通過代謝示蹤劑(如碳-13標(biāo)記物,就像給生物分子裝上了精確GPS定位器)跟蹤,以及呼吸穩(wěn)定同位素分析儀實時監(jiān)測動物呼出氣體中的13CO2來區(qū)分量化動物能量代謝中消耗的哪些能量物質(zhì)等,可以更深入的研究代謝生理學(xué)機(jī)制(如代謝靈活性)等,而這種定量測量特定能量物質(zhì)氧化速率往往也需要知道VCO2。

     

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    動物能量代謝與呼吸13C穩(wěn)定同位素技術(shù)部分應(yīng)用案例

     

    1)限水麻雀內(nèi)源性氨基酸的氧化

      

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    動物可以通過多種方式應(yīng)對脫水,包括行為和生理。每千焦耳蛋白質(zhì)氧化產(chǎn)生的代謝水比脂肪或碳水化合物產(chǎn)生的更多,鳥類會因高水分流失率而增加蛋白質(zhì)分解代謝。然而,為響應(yīng)限水而動員的氨基酸氧化尚未有詳細(xì)研究。

     

    研究者給圈養(yǎng)的家麻雀喂食13C標(biāo)記的亮氨酸9周,以標(biāo)記內(nèi)源性蛋白質(zhì)。每周進(jìn)行一次試驗,在此期間,測量了對限水的生理反應(yīng),如瘦體重、脂肪量、新陳代謝的變化以及呼出二氧化碳中13的富集(δ13Cbreath)。研究發(fā)現(xiàn),限水的鳥類分解代謝了更多的瘦肉組織,并且還富集了δ13Cbreath以響應(yīng)限水。然而,δ13Cbreath隨代謝率和限水期的長短而變化,這表明當(dāng)可以使用其它生理策略實現(xiàn)水分平衡時,鳥類可能會節(jié)省蛋白質(zhì)。

     

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    文中使用儀器技術(shù):定量磁共振用于身體成分分析;G2131-I同位素碳分析儀測量13Cδ呼氣;SSI標(biāo)準(zhǔn)流通式呼吸測量技術(shù)在蒸發(fā)失水(EWL)和δ13C呼吸的同時測量RMR。需要說明的是,美國Sable公司新推出的13C穩(wěn)定性同位素分析儀具備便攜性、高精度、實時測量、無需耗材及外部校準(zhǔn)、與能量代謝測量系統(tǒng)兼容、高性價比等諸多優(yōu)勢以滿足多領(lǐng)域科學(xué)家的期待。

     

    2) 牦牛糞菌助高原鼠兔回收氮源,適應(yīng)冬季低蛋白環(huán)境

     

    氮平衡是食草動物在食用低氮飲食時面臨的主要挑戰(zhàn)。腸道微生物群介導(dǎo)的尿素氮循環(huán)促進(jìn)了缺氮時期的蛋白質(zhì)穩(wěn)態(tài),但其與野生非冬眠小型哺乳動物的相關(guān)性仍不清楚。文中實驗通過同位素示蹤、能量代謝測量、宏基因組學(xué)、靶向短鏈脂肪酸分析和糞便微生物群移植相結(jié)合,研究了冬季蛋白質(zhì)限制對青藏高原鼠兔(Ochotona curzoniae)尿素氮循環(huán)的影響。

    在呼吸穩(wěn)定同位素測量實驗中,將每只鼠兔放入圓柱形聚乙烯代謝室中該腔室通過 Tygon管連接到FMS新款便攜式呼吸代謝測量儀,以調(diào)節(jié)氣流并維持CO2濃度約為1%,確保可靠的δ13C測量。將鼠兔放入腔室后,立即在鋁箔氣囊中收集基線呼吸樣本。每30分鐘收集一次后續(xù)樣本。每個空氣樣品13C:12C比率(稱為δ13C,以%表示)通過元素分析儀與同位素比質(zhì)譜儀(IRMS)離散方式測量。由此得到δ13C值以每mil(‰)表示,參考Regan2022Science論文公式


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      在冬季蛋白質(zhì)限制期間,肝臟尿素循環(huán)代謝下調(diào),伴隨著具有尿素溶解能力的有益細(xì)菌(如阿利斯肽屬)、腸道脲酶活性和尿素轉(zhuǎn)運蛋白的增加,以及乙酸鹽的產(chǎn)生,隨之增加氮重新?lián)饺胧笸玫牡鞍踪|(zhì)庫。至關(guān)重要的是,用牦牛糞便微生物群補(bǔ)充低蛋白飲食通過增加阿利斯肽豐度來增強(qiáng)尿素溶解能力,揭示了一種關(guān)鍵機(jī)制,即同域物種之間的種間水平微生物轉(zhuǎn)移增強(qiáng)了宿主蛋白穩(wěn)態(tài)。

      作者的研究結(jié)果揭示了腸道微生物群在尿素氮循環(huán)中的功能作用,以維持冬季活動的草食性小型哺乳動物的蛋白質(zhì)平衡,并有助于理解物種共存和哺乳動物對高海拔環(huán)境的適應(yīng)。研究結(jié)果表明,微生物群驅(qū)動的尿素氮循環(huán)是冬季活動食草動物蛋白質(zhì)穩(wěn)態(tài)的關(guān)鍵適應(yīng)策略。這項工作為哺乳動物適應(yīng)高海拔環(huán)境的機(jī)制和種間共存的動態(tài)提供了新的見解。 

     

    參考文獻(xiàn)

     

    Rogers EJ, Gerson AR. Water restriction increases oxidation of endogenous amino acids in house sparrows (Passer domesticus). J Exp Biol. 2024 Mar 15;227(6):jeb246483. doi: 10.1242/jeb.246483. Epub 2024 Mar 15. PMID: 38380522; PMCID: PMC11093224.

     

    Shi F, Zou D, Zhang L, Guo N, Yu J, Degen AA, Tang X, Ren S, Ru Y, Zheng S, Zhang Y, Wang D. Increased urea nitrogen salvaging by a remodeled gut microbiota helps non hibernating pikas maintain protein homeostasis during winter. PLoS Biol. 2025 Oct 16;23(10): e3003436. doi:10.1371/journal.pbio.3003436.

     

    易科泰生態(tài)技術(shù)公司積十幾年動物能量代謝測量技術(shù)研究服務(wù)經(jīng)驗,與美國、歐洲等國際能量代謝技術(shù)公司合作,為國內(nèi)動物生理生態(tài)、生物醫(yī)學(xué)研究等提供全面精準(zhǔn)技術(shù)方案:

    ü SSI呼吸代謝系統(tǒng)(模塊式或便攜式)+穩(wěn)定性同位素氣體分析儀

    ü FMS便攜式多功能能量代謝測量儀+小動物跑步機(jī)+穩(wěn)定性同位素氣體分析儀

    ü 定制動物(包括風(fēng)洞等)或人體呼吸穩(wěn)定性同位素分析系統(tǒng);

    ü 已購買Sable所有系列產(chǎn)品的客戶系統(tǒng)配置升級,包括小動物跑步機(jī)、呼吸同位素分析等

    ü 植入式動物體溫心率檢測、Thermo-RGB高靈敏度紅外熱成像體溫監(jiān)測技術(shù)、動物行為、活動狀態(tài)監(jiān)測技術(shù)、元素分析儀系統(tǒng)

    ü 基于動物能量代謝測量技術(shù)與客戶合作共同開發(fā)動物生理生態(tài)研究領(lǐng)域新產(chǎn)品等


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