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簡要描述：穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞構(gòu)建實驗：用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法或慢病毒侵染的方法將構(gòu)建好的含靶基因的載體導入細胞，根據(jù)不同的基因載體中所含的抗性標志選用相應的藥物進行篩選混合陽性克隆。在陽性混合克隆的基礎上，得到單細胞長出的陽性單克隆，繼而得到穩(wěn)轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)染細胞株。
更新時間：2022-12-23瀏覽次數(shù)：2504詳細介紹
穩(wěn)轉(zhuǎn)株構(gòu)建實驗原理：
穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株是指經(jīng)合適的藥物濃度進行藥物篩選后，得到外源DNA穩(wěn)定整合到宿主染色體，并可以長時間表達外源目的基因的細胞。穩(wěn)定表達細胞株彌補了瞬時感染(或轉(zhuǎn)染)實驗中外源基因表達時間短的缺陷，便于長期觀察。穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞的篩選需根據(jù)不同基因載體中所含有的抗性標志選用相應的藥物，常用的抗性篩選有嘌呤霉素(puromycin)、 新霉素(neomycin)等。若實驗需求構(gòu)建穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株，我們建議通過慢病毒感染細胞進行藥物篩選的方法，此方法較質(zhì)粒轉(zhuǎn)染可以更加有效的將外源基因整合入基因組，且整合位點處于轉(zhuǎn)錄相對活躍的區(qū)域，從而獲得更加高效表達外源基因的穩(wěn)轉(zhuǎn)株細胞。
穩(wěn)轉(zhuǎn)株構(gòu)建實驗服務選擇：
1、穩(wěn)轉(zhuǎn)株整體服務(克隆構(gòu)建、病毒包裝穩(wěn)轉(zhuǎn)株構(gòu)建、檢測、單克隆細胞株篩選)；
2、穩(wěn)轉(zhuǎn)株構(gòu)建(穩(wěn)轉(zhuǎn)株構(gòu)建、檢測、單克隆細胞株篩選)。
穩(wěn)轉(zhuǎn)株構(gòu)建檢測服務說明
1、穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株以及陰性對照；
2、穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株鑒定結(jié)果；
3、客戶可免費使用已有的細胞株，若庫中沒有的需要客戶提供；
4、客戶需提供代轉(zhuǎn)染的質(zhì)粒，也可委托代構(gòu)建。
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